在細胞培養的實驗中,難免會遇到這樣那樣的問題,比如細胞不貼壁、HP值變化迅速、細胞凋亡、等等。
細胞生長緩慢
1.培養基或血清改變:比較不同培養基配方中葡萄糖、氨基酸及其他成分有無差異;通過生長實驗比較新老批次血清有無差異;增大細胞初始接種密度;使細胞逐步適應新的培養基。
2.必需生長促進成分(如L-谷氨酰胺或生長因子)耗竭、缺乏或分解:去除原培養基,加入新鮮培養基;向培養基中添加生長促進成分(如L-谷氨酰胺)。
3.輕度細菌或真菌污染:在不添加抗生素的條件下進行培養,如細胞被污染,滅菌處理后丟棄。
4.時間存儲不當:血清應于-5℃至-20℃下儲存;培養基應于2℃~8℃下避光儲存;盡量減少血清和培養基見光時間。
5.細胞初始接種密度低:增大活細胞接種密度。
6.細胞衰老、老化:將老化細胞丟棄,取用代數較少的細胞。
7.支原體污染:隔離細胞,檢測是否感染支原體;清洗通風廚和培養箱,如細胞被污染,滅菌處理后丟棄。