目前,
細(xì)胞因子生物學(xué)活性檢測(cè)和濃度測(cè)定方法主要有以下幾類:
一.生物學(xué)檢測(cè)法
生物學(xué)檢測(cè)又稱生物活性檢測(cè),是根據(jù)細(xì)胞因子特定的生物活性而設(shè)計(jì)的檢測(cè)法。由于各種細(xì)胞因子具有不同的活性,例如il-2促進(jìn)淋巴細(xì)胞增殖,tnf殺傷腫瘤細(xì)胞,csf刺激造血細(xì)胞集落形成,ifn保護(hù)細(xì)胞免受病毒攻擊,因此選擇某一細(xì)胞因子*的生物活性,即可對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)。生物活性檢測(cè)法又可分為以下幾類:
1.細(xì)胞增殖法
許多細(xì)胞因子具有細(xì)胞生長(zhǎng)因子活性,特別是白細(xì)胞介素,如il-2刺激t細(xì)胞生長(zhǎng)、il-3刺激肥大細(xì)胞生長(zhǎng)、il-6刺激漿細(xì)胞生長(zhǎng)等。利用這一特性,現(xiàn)已篩選出一些對(duì)特定細(xì)胞因子起反應(yīng)的細(xì)胞,并建立了只依賴于某種因子的細(xì)胞系,即依賴細(xì)胞株鑒定il-2的含量。除依賴株外,還有一些短期培養(yǎng)的細(xì)胞,如胸腺細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、促有絲分裂原刺激后的淋巴母細(xì)胞等,均可作為靶細(xì)胞來(lái)測(cè)定某種細(xì)胞因子活性。
2.靶細(xì)胞殺傷法
是根據(jù)某些細(xì)胞因子能在體外殺傷靶細(xì)胞而設(shè)計(jì)的檢測(cè)方法。通常靶細(xì)胞多選擇體外長(zhǎng)期傳代的腫瘤細(xì)胞株,利用同位素釋放法或染料染色等方法判定細(xì)胞的殺傷率。
3.細(xì)胞因子誘導(dǎo)的產(chǎn)物分析法
某些細(xì)胞因子可刺激特定細(xì)胞產(chǎn)生生物活性物質(zhì),如il-2、il-3誘導(dǎo)骨髓細(xì)胞合成胺、il-6誘導(dǎo)肝細(xì)胞合成α1-抗糜蛋白酶等。通過(guò)測(cè)定所誘生的相應(yīng)產(chǎn)物,可反映細(xì)胞因子的活性。