實驗小貼士
如何溶解凍干蛋白或抗體
為確保蛋白或抗體(以下簡稱“蛋白")的*復(fù)溶,推薦
如下步驟進行操作:
1)打開蓋子前,輕輕敲擊瓶子,或短時間離心瓶子,使粘在瓶蓋或瓶壁上的凍干物沉到瓶底。
2)采用說明書中推薦的緩沖液及儲存濃度復(fù)溶。如所需蛋白儲存液濃度高于說明書的推薦濃度,可用至少不少于100ul的緩沖液復(fù)溶,以確保瓶內(nèi)全部蛋白的充分溶解。
3)蛋白溶解前,所需的緩沖液及蛋白本身均須平衡至室溫后再進行溶解操作。
4)蛋白溶解時,加入緩沖液后并蓋好蓋子。手動輕輕顛倒或用低速搖擺平臺混勻。注意:不要使用渦旋振蕩器或槍頭吸打。
5)分裝或使用蛋白前,須將復(fù)溶的蛋白在室溫中輕輕晃動至少15分鐘。
6)在聚丙烯管或硅化管中以單次使用量分裝重溶好的蛋白,并儲存于-70度。建議每管體積不少于10ul,且保存過程中避免反復(fù)凍融。
Ticket:BSA的要求
R&D Systems使用Bovine Serum Albumin (Sigma, Cat#A7030)進行凍干蛋白的重溶。我們同樣建議客戶使用相同的或相當(dāng)級別的BSA。
重熔使用的緩沖液
貨號 產(chǎn)品名稱
RB02 0.1% BSA in PBS
RB01 PBS
RB04 0.1% BSA in 4mM HCL
RB05 100 mM Acetic Acid
RB03 4 mM HCL
RB06 0.1% BSA in 100mM Acetic Acid
RB07 Deionized water